規格介紹
一、兔多克隆抗體制備服務
1、服務要求：目前我們暫不提供抗原制備服務，客戶需自己提供抗原。我們對抗原的要求如下：1）3-5mg蛋白，純度在85%以上；2）樣品溶解于pH偏中性的緩沖液，最好為PBS。如含有尿素，去污劑或有機試劑等請事先告之；3）濃度不低于0.2mg/ml。
2、制備方法：我們用兩只健康新西蘭大白兔進行抗體制備實驗，免疫4次，保證效價在1:32000以上（P/N≥2.1）。實驗周期為90天。具體實驗過程請參見下表：
| 時間（天） | 實驗內容 | 具體說明 |
| 0-7 |
1）抗原檢測 2）陰性血清采集 |
1）SDS-PAGE檢測抗原純度；2）抗原濃度檢測；3）制備1.5ml免疫前血清 |
| 8 | 第1次免疫 | 抗原與弗氏完全佐劑乳化，多點注射 |
| 29 | 第2次免疫 | 抗原與弗氏不完全佐劑乳化，多點注射 |
| 36 | 取血樣1 | 耳緣靜脈取血2ml，制備1ml血清 |
| 50 | 第3次免疫 | 抗原與弗氏不完全佐劑乳化，多點注射 |
| 57 | 取血樣2 | 耳動脈或心臟采血10ml，制備5ml血清 |
| 71 | 第4次免疫 | 抗原與弗氏不完全佐劑乳化，多點注射 |
| 81 | 頸動脈放血 | 每只兔子可得到60ml左右的血清。 |
| 82-88 | 血清效價檢測 | 用間接ELISA測定2-4免血清效價 |
| 89 | 快遞交貨 | 1）100ml血清；2）效價檢測報告 |
3、交貨內容
1）1ml免疫前血清；2）100ml-150ml免疫血清，效價大于1:32000；3）效價檢測報告：2-4免血清的間接ELISA結果。
備注：我們提供抗體純化服務，但需要客戶額外支付費用。
二、單克隆抗體
1、服務要求：目前我們暫不提供抗原制備服務，客戶需自己提供抗原。我們對抗原的要求如下：1）1-3mg純化蛋白，純度在85%以上；2）樣品溶解于pH偏中性沖液，最好為PBS。如含有尿素，去污劑或有機試劑等請事先告之；3）濃度不低于0.2mg/ml。
2、制備方法：我們免疫4只Balb/c小鼠，通過細胞融合與篩選制備單克隆抗體。實驗周期為150天。具體實驗過程請參見下表：
| 時間（天） | 實驗內容 | 具體說明 |
| 0-7 | 1）抗原檢測 | 1）SDS-PAGE檢測抗原純度；2）抗原濃度檢測； |
| 8 | 第1次免疫 | 抗原與弗氏完全佐劑乳化，多點注射 |
| 29 | 第2次免疫 | 抗原與弗氏不完全佐劑乳化，多點注射 |
| 50 | 第3次免疫 | 抗原與弗氏不完全佐劑乳化，多點注射 |
| 57 | 取血樣 | 眼眶取血100-200ul，用于免疫效果檢測 |
| 71 | 加強免疫 | 抗原不加佐劑，劑量加倍，腹腔注射 |
| 74 | 細胞融合 | 用PEG1450將脾細胞與SP2/0細胞融合 |
| 84 | 檢測與克隆1 | 細胞培養 |
| 94 | 檢測與克隆2 | 細胞培養 |
| 104 | 檢測與克隆3 | 克隆一般進行3次，直到陽性率達到100%為止 |
| 105-114 | 檢測與擴大培養 | 用于注射小鼠制備腹水與細胞株的凍存 |
| 115-120 | 注射腹水 | 等待腹水長出 |
| 121-140 | 采集腹水 | 完成腹水采集 |
| 141-147 | 腹水純化與檢測 | 采用辛酸-硫酸銨法純化腹水 |
| 148-150 | 交貨 | 1）實驗記錄；2）兩株單克隆的雜交瘤細胞；3）兩株單抗的純化腹水各5ml。 |
1）實驗記錄；
2）兩株單克隆的雜交瘤細胞；
3）兩株單抗對應的純化腹水各5ml。
